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一、多功能凈化柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法
1 簡(jiǎn)介
多功能凈化柱是由多種固相復(fù)合填料不僅包括大分子物質(zhì),更重要的是含有多種活性親脂性(非極性)和帶電(極性)物質(zhì),用來(lái)吸附各種酯類,葉黃素,化學(xué)物質(zhì),碳水化合物和蛋白質(zhì)等干擾物。多功能凈化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能凈化柱可以將AFT B1、B2、G1、G2很好的分離出來(lái),然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測(cè)定AFT B1、B2、G1、G2含量。
2 多功能凈化柱特點(diǎn):
2.1 多功能凈化柱可以簡(jiǎn)化樣品提取、凈化步驟,無(wú)需清洗和洗提。
2.2 可以實(shí)現(xiàn)多種毒素檢測(cè),有效降低檢測(cè)成本;
2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化,可以有效提高檢測(cè)靈敏度,實(shí)現(xiàn)較低的檢測(cè)限(AFT B1 0.05ppb);
2.4 光化學(xué)衍生操作簡(jiǎn)便,無(wú)需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高);
2.5 一步法凈化,回收率高達(dá)90%左右。
2.6 廣泛適用于各類農(nóng)產(chǎn)品:谷物、淀粉、動(dòng)物飼料、食品、堅(jiān)果、棉籽等。
3 多功能凈化柱/KRC衍生法操作步驟簡(jiǎn)介:
3.1 提取樣品:研磨粉碎、稱重25g樣品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合樣品,
高速均質(zhì) 1 分鐘。
3.2 過(guò)濾:將提取的樣品定量濾紙過(guò)濾,收集濾液;
3.3 取4-6ml濾液快速通過(guò) 多功能凈化柱PribofastM226 或Pribofast M260
3.4 收集過(guò)柱溶液,直接用于HPLC檢測(cè),KRC衍生化后直接記錄AFT濃度。
二、免疫親和柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法
1 簡(jiǎn)介
Pribofast AFT總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素,從而對(duì)毒素樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測(cè)定AFT B1、B2、G1、G2濃度,提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度。
2 免疫親和柱/KRC衍生法特點(diǎn):
2.1 特異性很強(qiáng)使得樣品凈化效果;
2.2 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速,提高檢測(cè)效率高
2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高檢測(cè)靈敏度,實(shí)現(xiàn)較低的檢測(cè)限 (AFT B1 0.05ppb)。
2.4 衍生化操作方便,光化學(xué)衍生化無(wú)需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高)。
2.5 回收率高,達(dá)到90%以上
3 免疫親和柱法操作步驟簡(jiǎn)介:
3.1 提取樣品:研磨、稱重50g樣品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物將樣品
高速混勻 1 分鐘。
3.2 過(guò)濾:將提取的樣品濾膜過(guò) 玻璃纖維濾紙,
3.3 將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進(jìn)行過(guò)柱凈化:經(jīng)過(guò)Pribofast AFT總量免疫親和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脫三步驟,洗脫下來(lái)的溶液可直接用于HPLC檢測(cè);
3.4 測(cè)定:HPLC直接進(jìn)樣,經(jīng)色譜柱、KRC光化學(xué)柱后衍生化后直接記錄AFT濃度;
三、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)AFT總量
1 采取直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,利用酶標(biāo)儀測(cè)定樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的樣本的吸光值計(jì)算得到樣品中AFT總量的含量。
2 試劑盒檢測(cè)時(shí)間:15分鐘+15分鐘
3 檢測(cè)限:0.1ppb
4 交叉反應(yīng)率:
Aflatoxin B1 | 100% |
Aflatoxin B2 | 80% |
Aflatoxin G1 | 101% |
Aflatoxin G2 | 100% |
AflatoxinM1 | 25% |
關(guān)于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數(shù)
●Pribofast KRC 柱后光化學(xué)衍生器 波長(zhǎng):254 nm
●HPLC-色譜柱: AFT色譜柱150 x 4.6 mm; C-18
●流動(dòng)相: 甲醇/水 (45/ 55 v / v)
●流量:1.0 mL/min 柱溫: 30 °C
●進(jìn)樣體積:20μL
●熒光檢測(cè)器:λ-激發(fā)波長(zhǎng):365 nm λ-發(fā)射波長(zhǎng):440 nm
●液相色譜儀需要配制:PriboLab公司Pribofast KRC 柱后光化學(xué)衍生器,含有1ml反應(yīng)池,納米燈管254nm
關(guān)于AFT色譜柱:
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱及規(guī)格 | 數(shù)量 |
IAC-010-3 | Pribofast, Aflatoxins B1, B2, G1, G2 25 columns/pck 3mL, widebore column AFT總量免疫親和柱3ml,25支/盒 | 1盒 |
M226 | PriboFast®226 Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone 霉菌毒素多功能凈化柱,用于AFT、玉米赤霉烯酮檢測(cè)25支/盒 | 1盒 |
PriboFast® 260 | PriboFast® 260 Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone 霉菌毒素多功能凈化柱,用于AFT、玉米赤霉烯酮檢測(cè)25支/盒 | 1盒 |
PR K010-96 | Pribofast ELISA Kit (96-well plate/stripes) for detection of Aflatoxin B1, B2, G1, G2 in food and feed samples AFT 總量ELISA試劑盒包,96孔 | 1盒 |
STD#1081 | Standard, Solution of 4 different aflatoxins in acetonitrile B1, G1 AFT B1B2G1G2 混合標(biāo)樣。1ml裝,4度陰暗保存 也可提供AFT B1B2G1G2 四種單獨(dú)的固體裝標(biāo)準(zhǔn)品。 | 1盒 |
KRC-25 | Photochemical Reactor for Enhanced Detection Aflatoxin B1, B2, G1, G2; Pribofast KRC-25 230V 50 HzUVE 254 nm lamp Pribofast KRC 光化學(xué)柱后衍生反應(yīng)系統(tǒng),254nm納米紫外燈 | 1套 |
ODS-150 | HPLC-Column for Aflatoxin Analysis, C18 150 x 4.6 mm AFT液相色譜柱 | 1根 |
泵流操作架/免疫親和柱操作架,用于免疫親和柱樣品凈化操作 (含氣泵 轉(zhuǎn)換頭等配件,多用連接頭是選配) | 1套 |
關(guān)于PriboLab & 北京泰樂(lè)祺科技有限公司
作為面向提供霉菌毒素檢測(cè)技術(shù)解決方案的主要服務(wù)商之一,PriboLab憑借強(qiáng)大的研發(fā)團(tuán)隊(duì)和霉菌毒素檢測(cè)技術(shù)的研究,為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、食品加工與糧食、飼料工業(yè)等行業(yè)提供專業(yè)的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)品與技術(shù)服務(wù)。北京泰樂(lè)祺科技作為 PriboLab在中國(guó)的合作伙伴,積極為國(guó)內(nèi)客戶提供的霉菌毒素檢測(cè)技術(shù)與產(chǎn)品服務(wù),為國(guó)內(nèi)客戶提供適宜的霉菌毒素檢測(cè)方案,幫助客戶建立的霉菌毒素項(xiàng)目檢測(cè)分析平臺(tái)。