一、概要

   維生素B₁₂作為痕量元素，生物上屬于重要的螯合物膜劑，由含鈷的卟啉環(huán)作為中心原子組成，鈷是由4個(gè)氮原子、一個(gè)氫和一個(gè)二并咪唑組成。維生素B₁₂，為穩(wěn)定的復(fù)合物，在胃酸里一種所謂的內(nèi)源因子幫助下，被小腸下部分吸收。維生素B₁₂缺乏會(huì)導(dǎo)致惡性貧血，這種疾病不是由于維生素B₁₂供給不足，而是因?yàn)槿狈?nèi)源因子。惡性貧血者可服用高劑量的維生素B₁₂。

現(xiàn)有的檢測程序主要是微生物方法（1），但也有高效液相色譜法和薄層色譜法，這些需要高量的時(shí)間和儀器。

本檢測試劑盒定量檢測維生素食品（2）中的維生素B₁₂，要比傳統(tǒng)的微生物分析法（24-48小時(shí)）更快，包含樣品預(yù)處理只需2.5-4個(gè)小時(shí)。

二、檢測原理

   維生素B₁₂定量測試基于酶聯(lián)免疫吸收分析原理。針對維生素B₁₂的抗體約束在酶標(biāo)板上。樣品維生素B₁₂和維生素B₁₂過氧化物酶結(jié)合物加到酶標(biāo)板孔中。標(biāo)記的酶和游離維生素B₁₂競爭抗體結(jié)合位點(diǎn)。在室溫下培育一小時(shí)后，用稀釋的洗滌液洗孔，去掉未結(jié)合物。加入培養(yǎng)基溶液，培育20分鐘，變成藍(lán)色。加入停止液抑制顏色發(fā)展，顏色變成了黃色，ELISA讀數(shù)器測量黃色，維生素B₁₂濃度間接的和測試樣品顏色強(qiáng)度成比例。